【中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)簡介】：是一種由LCN2基因編碼的蛋白質(zhì)。NGAL通過封存鐵并阻止細菌使用，從而限制其生長，參與先天免疫。 它在中性粒細胞中表達，在腎臟、前列腺、呼吸道和消化道的上皮細胞中也有低水平表達。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（NGAL）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（NGAL）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣本的要求：人(NGAL)ELISA檢測試劑盒 酶聯(lián)免疫吸附測定

1. 檢測的樣本類型為液體類標本（細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸腹水等）

2. 軒澤康生物有限公司只負責ELISA試劑盒本身，而不包括準備檢測的樣品?？蛻魬?yīng)該提前計算整個試驗中需要使用的樣品數(shù)量，準備好足夠的樣本。

3. 標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，溶血標本不宜進行此項檢測。

4. 客戶的樣本收集后，立即按要求保存，切忌反復(fù)凍融。一周內(nèi)檢測：4℃保存。超過一周請于-20℃（建議不超過1個月）或-80℃密封保存（建議不超過6個月）。

5. 標本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)直接加熱使之溶解。

人(NGAL)ELISA檢測試劑盒 酶聯(lián)免疫吸附測定性能：

【準確性】：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

【檢測范圍】：請咨詢我司銷售人員領(lǐng)取說明書

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于1.0 ng/mL

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)

【重復(fù)性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

技術(shù)小提示：

1.      當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫。

2.      為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請充分混合。

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